大鼠促甲狀腺激素（TSH）ELISA試劑盒

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南京信帆生物在科研、中引進(jìn)了一系列設(shè)備和儀器，為公司的迅速應(yīng)用提供了便利條件，使達(dá)到優(yōu)質(zhì)高效，保證了產(chǎn)品的高質(zhì)量。同時(shí)，公司嚴(yán)格遵守GMP管理的要求，從原料采購(gòu)、、銷(xiāo)售到售后服務(wù)，所有的活動(dòng)均嚴(yán)格按照質(zhì)檢規(guī)程和崗位標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行，并保留完整的記錄。嚴(yán)格、規(guī)范的管理保證了公司產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。

Elisa試劑盒樣本處理及要求：

ELISA 的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃，必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng) 天就進(jìn)行 檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在 4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫?有條件的，好-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

ELISA實(shí)驗(yàn)中老師問(wèn)題集錦：

☆★問(wèn):選擇酶標(biāo)儀注意事項(xiàng)？

☆★答:酶標(biāo)比色儀簡(jiǎn)稱(chēng)酶標(biāo)儀，通常指專(zhuān)用于測(cè)讀 ELISA 結(jié)果吸光度的光度計(jì)。酶標(biāo)儀的主要性 能指標(biāo)有：測(cè)讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測(cè)范圍、線(xiàn)性等等。優(yōu)良的酶標(biāo) 儀的讀數(shù)一般可精確到 0.001，準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá) 0.5%。酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽(yáng)光或強(qiáng) 光照射下，操作時(shí)室溫宜在 15~30℃，使用前先預(yù)熱儀器 15-30 分鐘，測(cè)讀結(jié)果更穩(wěn)定。

☆★問(wèn):是否提供代測(cè)服務(wù)？

☆★答:購(gòu)買(mǎi)我司ELISA試劑盒，可以提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。上海和南京地區(qū)的客戶(hù)可以提供免費(fèi)上門(mén)取樣的服務(wù)，其他地方的老師可以把樣本用EP管裝好，編好號(hào)。放到泡沫箱子中，用干冰和冰袋寄送。我們是收到樣本后7個(gè)工作日出實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括說(shuō)明書(shū)，實(shí)驗(yàn)室用的儀器型號(hào)，數(shù)據(jù)，標(biāo)曲等。

☆★問(wèn):實(shí)驗(yàn)中造成回收率偏高的原因？

☆★答:添加量不準(zhǔn)確，精準(zhǔn)的添加量。添加濃度不適合，添加合適的濃度。

取液吹干量多，準(zhǔn)確的取液吹干。

取到其它相層液體，取需用相吹干。

復(fù)溶液未稀釋或加入量少，正確的稀釋復(fù)溶液。

☆★問(wèn):實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性的原因？

☆★答:水質(zhì)原因，可以點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證，或者用純凈水。

實(shí)驗(yàn)操作原因，包括吸取到其它相吹干，離心不徹底，樣本的污染，乳化未處理完全。可以準(zhǔn)確的取樣吹干，延長(zhǎng)離心時(shí)間，更換樣本，溫浴（70℃）處理乳化現(xiàn)象。

儀器試劑原因，離心管未清洗干凈。有機(jī)溶劑的影響，可以做試劑空白看影響結(jié)果。

衍生化試劑原因（長(zhǎng)時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)）。

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