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3xFLAG peptide
  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2024-12-13
  • 訪  問  量:632
簡(jiǎn)要描述:

3xFLAG peptide:工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml,可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白

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產(chǎn)品詳情

南京信帆生物對(duì)質(zhì)量的控制涵蓋生物試劑、放行、市場(chǎng)質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗(yàn)和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場(chǎng)不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品品質(zhì)。信帆生物致力于追求企業(yè)的發(fā)展,以創(chuàng)新為根本,不斷優(yōu)化運(yùn)作,為每一位科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和更熱情的服務(wù)。

10MG/[920.00]

3xFLAG peptide

簡(jiǎn)介:3X FLAG Peptide是一個(gè)合成的含有三個(gè)重復(fù)DYKXXD氨基酸序列的多肽。

氨基酸序列:MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK(簡(jiǎn)稱)

N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-C(全稱)

分子式:C120H169N31O49S 分子量:2861.87

技術(shù)指標(biāo)

外觀:凍干粉

純度:>95% by LC-MS

溶解性:water 2mg/ML; TBS (5mg/ml);

儲(chǔ)存條件:-20

運(yùn)輸條件:常溫運(yùn)輸

用途:蛋白洗脫;科研試劑。

使用方法推薦(來自公開文獻(xiàn)僅供參考)

一:常見儲(chǔ)存液或者工作液配置方法

儲(chǔ)存液配置:3xFLAG peptide溶于1XTBS(pH7.4),濃度為5mg/ml; 分裝儲(chǔ)存于-20℃,避免反復(fù)凍融。

工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液濃度為100ug/ml,可用于從Anti-FLAG M2親和凝膠上洗脫3xFLAG融合蛋白。5倍柱體積的工作溶液即可充分洗脫大部分3xFLAG融合蛋白

二:

哺乳動(dòng)物細(xì)胞FLAG標(biāo)簽蛋白純化方案

一般注釋以下方案基于并優(yōu)化了哺乳動(dòng)物細(xì)胞(U2OS)中FLAG標(biāo)記蛋白的過表達(dá),該細(xì)胞生長(zhǎng)在一個(gè)10平方厘米的平板上,以90%的融合率轉(zhuǎn)染,并在48小時(shí)后收獲。該方案適用于相互作用蛋白的共純化(基于FLAG-Ring1B/Bmi1)。

1重新懸浮和Sonicate細(xì)胞將冷凍的哺乳動(dòng)物細(xì)胞沉淀重新懸浮在2 mL FLAG純化懸浮緩沖液(1XPBS、1mM DTT、1X蛋白酶抑制劑)中。為了保持酶活性,這種再懸浮緩沖液不含任何裂解劑。除了超聲波處理(1%Triton X或其他)外,非用于活性采集的純化物還可以使用實(shí)際的裂解緩沖液。該方案僅使用超聲波處理。

將混合物轉(zhuǎn)移到干凈的2 mL微管中,用Misonix XL-2000聲波儀上的“振幅設(shè)置1[共20個(gè)]"超聲處理2次,每次持續(xù)10秒,中間暫停1分鐘。

2制備細(xì)胞裂解物并用磁珠孵育。在4℃下以12000 g離心細(xì)胞裂解物20分鐘,使裂解物碎片沉淀。

使用2mL“微量"純化柱,用2mL FLAG純化懸浮緩沖液沖洗柱。

將100µL M2 FLAG親和珠轉(zhuǎn)移到柱中,用2 mL FLAG純化懸浮緩沖液洗掉凝膠。

干燥柱鼻(底部),并用蓋子緊緊蓋上,然后轉(zhuǎn)移離心機(jī)中的上清液



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