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本產品僅供科研實驗，不得用于醫療或食用
| 產品名稱： | 人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 | ||||
| 產品英文名稱： | Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA kit | ||||
| 產品規格： | 96T/48T | ||||
| 產品用途： | 科研實驗 | ||||
| 保存條件： | 2-8℃ | ||||
| 有效期： | 6個月 | ||||
人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 BDNF是體內含量zui多的神經營養因子，它通過與TrkB（酪氨酸激酶 B）的結合而發揮作用。TrkB的胞內區域具有內在的酪氨酸激酶活性，BDNF與TrkB結合后激活胞內區域，引起TrkB自身磷酸化作用增強，進而激活Ras-MAPK通路，zui后在CAMP反應元件結合蛋白(CREB)的絲氨酸位點激活CREB。CREB通過增加BDNF基因及抗凋亡蛋白基因BCL-2的表達，來促進神經細胞生存，增加突觸可塑性及神經發生。作用方式具體如下：(1)增加突觸可塑性，進而影響長時程增強(long-term-ptentiati，nLTP)，后者是學習過程和記憶形成(第二級記憶)過程的基礎。(2)促進神經發生尤其是海馬的神經發生，Ernfors等[5]發現，BDNF基因敲除的雜合子小鼠，其神經病變的發生比野生型小鼠減少許多c.促進細胞生存的作用，主要體現在對各種神經元，尤其是對5-羥色胺(5-HT)和多巴胺(DA)能神經元的發育分化與生長再生具有維持和促進作用。 | |||||
| 組成 | |||||
| 1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶 | |||||
| 2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品（96μmol/L） 0.5ml×1 瓶 | |||||
| 3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 | |||||
| 4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份 | |||||
| 5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張 | |||||
| 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個 | |||||
| 標本要求 | |||||
| 1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能 | |||||
| 馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 | |||||
| 2．不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 | |||||
| 人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 | |||||
| 操作步驟 | |||||
| 1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 | |||||
| 釋。 | |||||
| 48μmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
| 24μmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
| 12μmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
| 6μmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
| 3μmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液 | |||||
| 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、 | |||||
| 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl， | |||||
| 然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡 | |||||
| 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 | |||||
| 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。 | |||||
| 4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 | |||||
| 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此 | |||||
| 重復5 次，拍干。 | |||||
| 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 | |||||
| 7. 溫育：操作同3。 | |||||
| 8. 洗滌：操作同5。 | |||||
| 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色 | |||||
| 10 分鐘. | |||||
| 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 | |||||
| 11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 | |||||
| 液后15 分鐘以內進行。 | |||||
| 人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 | |||||
| 計算 | |||||
| 以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的 | |||||
| OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD 值計算出標 | |||||
| 準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數， | |||||
| 即為樣品的實際濃度。 | |||||
| 注意事項 | |||||
| 1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未 | |||||
| 用完，板條應裝入密封袋中保存。 | |||||
| 2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。 | |||||
| 3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間 | |||||
| 控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。 | |||||
| 4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值 | |||||
| 大于標準品孔*孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計 | |||||
| 算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。 | |||||
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 | |||||
| 6．底物請避光保存。 | |||||
| 7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. | |||||
| 8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 | |||||
| 9．本試劑不同批號組分不得混用。 | |||||
| 保存條件及有效期 | |||||
| 1．試劑盒保存：；2-8℃。 | |||||
| 2．有效期：6 個月 | |||||
| 人腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 | |||||
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