無機磷檢測試劑盒(紫外微板法)的參考區間

產品簡介：

血清中的無機磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-兩種磷酸根陰離子組成，上述陰離子在在不同的 pH 環境下能快速相互轉換，在 pH7.4 血清中兩種磷酸根陰離子濃度比例為 1:4；在酸中毒環境下二者濃度約為 1:1；在堿中毒環境下二者濃度比例為1:9；在 pH4.5 尿液中濃度比例為 100:1。WHO 推薦的常規檢測方法為比色法，我國衛生部臨檢中心推薦的常規方法為硫酸亞鐵鉬藍比色法和米吐爾鉬藍比色法，亦可采用紫外分光光度法。無機磷檢測試劑盒(紫外微板法)無需處理樣本，利用無機磷與鉬酸銨結合生成磷鉬酸銨，通過酶標儀直接檢測 325～340nm 處吸光度，根據公式計算出無機磷含量。紫外法優點在于：操作簡單、快速、穩定；缺點在于：易受溶血、黃疸、脂血的干擾。該試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。 

操作步驟(僅供參考)：

1、(選做)制備樣品：

①血漿、血清樣品：血漿、血清按照常規方法制備，可以直接用于本試劑盒的測定，-20℃

凍存，用于 Pi 的檢測。

②細胞或組織樣品：取恰當細胞或組織進行勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于

Pi 的檢測。

③高濃度樣品：如果樣品中含有較高濃度的 Pi，可以使用 ddH2O 稀釋，不宜使用普通

蒸餾水稀釋。

④(選做)樣品準備完畢后可以用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度，以便于后續計

算單位蛋白重量組織或細胞內的 Pi 含量。

2、制備磷標準工作液：取適量的磷標準(1mg/ml)，按磷標準(1mg/ml)：磷標準稀釋液=1：

39 的比例稀釋，即獲得磷標準工作液(25 μg/ml=0.807 mmol/L)，4℃保存，用于 Pi的檢測。

3、制備鉬酸銨顯色液：稱取適量的鉬酸銨粉末，按照鉬酸銨粉末：鉬酸銨稀釋液(2×)：去

離子水=12mg：10ml：10ml 的比例混合溶解，即可使用。亦可稱取 120mg 鉬酸銨粉末加入 100ml 去離子水，充分溶解后分裝成 10ml 或適當規格的小份，使用時與鉬酸銨稀釋液(2×)等比例混合即可使用，-20℃保存，可適當延長保質期。鉬酸銨顯色液配制后可 4℃保存 2 周，如溶液變渾濁或顏色加深則應棄用。請注意，本產品提供多于實際用量的鉬酸銨粉末。

4、Pi 加樣：按照下表設置空白孔、標準孔、測定孔，溶液應按照順序依次加入，并注意避

免產生氣泡，小心混勻。如果樣品中的無機磷濃度過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置 2 平行孔，求平均值。

5、Pi 測定：混勻，室溫靜置 5min，以空白調零，酶標儀 340nm 處測定，讀取標準孔、

測定孔的吸光度(即為 A 標準，A 測定)。

計算：

血清、血漿中無機磷計算公式：磷=(A 測定/A 標準)×0.807×N(mmol/L)

=(A 測定/A 標準)×25×N(mg/L)

尿液中無機磷計算公式：磷=(A 測定/A 標準)×0.807×N(mmol/L)

=(A 測定/A 標準)×25×N(mg/L)

組織中磷計算公式：磷(mmol/mg)=(A 測定/A 標準)×0.807×N /c

式中：A 測定=測定管的吸光度

A 標準=標準管的吸光度

N=樣品稀釋倍數

c=待測樣品蛋白濃度(mg/L)

單位換算：1 mg/dL=10 mg/L=1 mmol/L×0.323

參考區間：健康成年人血清磷濃度：0.9～1.34mmol/L(2.76～4.16mg/dl)

注意事項：

1、 本法應在 5min～2h 內檢測，3h 后標準管吸光度無變化，測定管吸光度隨著時間的延長而上升。

2、 溶血樣本對檢測有干擾，盡量避免采用溶血樣本。

3、 黃疸和脂血樣本應做標本空白。

4、 本法能夠用于自動生化分析儀終點檢測法。

5、 如果樣品濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數

6、 340nm 測得的吸光度是 325nm 的 82%。

7、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期： 12 個月有效。常溫運輸，4℃保存。

無機磷檢測試劑盒(紫外微板法)的參考區間