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5×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)

更新時間:2023-08-03      瀏覽次數:564

 5×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)使用說明

 

產品名稱:5×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)

產品規格:10ml

儲存條件:-20

產品簡介    

本產品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質上樣用。其主要成份為SDS,巰基還原劑,溴酚藍,緩沖鹽溶液等。    

SDS可與蛋白質結合使蛋白質-SDS復合物上帶有大量的負電荷,這時蛋白質本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質本身電荷的差異,SDS還可以斷開分子內和分子間的氫鍵,破壞蛋白質分子的二級和三級結構,β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質的四級結構,消除了蛋白結構之間的差異。最終無電荷及結構上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關。溴酚藍用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結束的時間。

使用說明(僅供參考):

1. 請按每40 μL蛋白樣品加入10 μL上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋。

2. 混勻后,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性。

3. 冷卻到室溫后,10000-14000 rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。  

注意事項:

1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在30kd左右,膠濃度12%時,約在20kd左右,膠濃度15%時,大概在10kd。請根據自己目標條帶來判斷結果電泳時間。 

2. 本試劑因含巰基還原劑,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3.本產品僅供科研實驗用,不做其它用途。