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辛基-瓊脂糖凝膠FF預(yù)裝柱方法

更新時(shí)間:2022-12-21      瀏覽次數(shù):712

辛基-瓊脂糖凝膠FF預(yù)裝柱方法


相關(guān)介紹: 

辛基-瓊脂糖凝膠FF是一種將辛基鍵合在瓊脂糖微球上形成的中等疏水性疏水層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),與生物活性大分子有很好的相容性,具有離子交換容量高,非特異性吸附少,流速快等特點(diǎn),廣泛用于具有一定疏水性能的蛋白質(zhì)、多肽等生物大分子實(shí)驗(yàn)室規(guī)模制備和生物制藥、生物工程的工業(yè)化制備。


典型應(yīng)用如重組人粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、人集落刺激因子(M-CSF)、表皮生成因子(EGF)、生長激素(GH)的生產(chǎn)以及單克隆抗體的純化


品  名:辛基-瓊脂糖凝膠FF

英文名:Octyl NUPharose Fast Flow, Octyl NUPharose FF

規(guī)  格:20 ml,100 ml,1L,1 ml預(yù)裝柱

運(yùn)  輸:2 ~ 25℃,常壓、避光

貯  存:20%乙醇,2 ~ 25℃


使用方法:

1.1 根據(jù)分離目標(biāo)性質(zhì)配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

1.2 將凝膠抽干,并用蒸餾水洗滌2次去除保存的乙醇,用蒸餾水配成勻漿并脫氣。

1.3 將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。

1.4 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),使凝膠在柱內(nèi)自由沉降。

1.5 連結(jié)好柱子頂端活動(dòng)柱頭,打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)操作流速流過5柱體積,再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積,調(diào)節(jié)適配柱頭,使其盡量貼近膠面,最后用2 ~ 3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。


注意:

1)所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。

2)如無條件做1.2,填料層有氣泡,可進(jìn)行2次裝柱,去除保存的乙醇和氣泡。

3)乙醇等試劑配制的溶液需要脫氣。


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