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8-異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒是什么?

更新時間:2017-08-03      瀏覽次數:1274

8-異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒基本信息簡介

前列腺素(prostaglandin,PG)是存在于動物和人體中的一類不飽和脂肪酸組成的、具有多種生理作用的活性物質。zui早發現它存在于人的中,當時以為這一物質是由前列腺釋放的,因而定名為前列腺素。現已證明中的前列腺素主要來自精囊,全身許多組織細胞都能產生前列腺素。前列腺素在體內由花生四烯酸所合成,結構為一個五環和兩條側鏈構成的20碳不飽和脂肪酸。按其結構,前列腺素分為A、BC、D、EF、G、HI等類型。不同類型的前列腺素具有不同的功能,如前列腺素E能舒張支氣管平滑肌,降低通氣阻力;而前列腺素F的作用則相反。前列腺素的半衰期極短(12分鐘),除前列腺素I2外,其他的前列腺素經肺和肝迅速降解,故前列腺素不像典型的激素那樣,通過循環影響遠距離靶向組織的活動,而是在局部產生和釋放,對產生前列腺素的細胞本身或對鄰近細胞的生理活動發揮調節作用。前列腺素對內分泌、、消化、血液呼吸、心血管、泌尿及神經系統均有作用。分子式:C20H32O5 分子量:352.47 CAS 363-24-6

8-異前列腺素(8-iso-PG)elisa試劑盒實驗條件簡介

1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。

 ?。?/span>2 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4 1824小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.11.010μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為110μg/ml

 ?。?/span>3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。

4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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